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PCR儀的實驗操作注意事項

更新時間:2023-02-20      點擊次數(shù):755
PCR儀可應(yīng)用在多個領(lǐng)域,食品安全、水產(chǎn)養(yǎng)殖病害、寵物傳染病、植物病害、科研等,如食品工業(yè)鏈條中食品安全生物因素的檢測,對致病微生物檢測、轉(zhuǎn)基因原料鑒別、摻假摻雜鑒別等。
實驗操作注意事項:
1.戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套;
2.使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長時間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;
3.避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;
4.操作多份樣品時,制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的精確度;
5.最后加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管;
6.操作時設(shè)立陰陽性對照和空白對照,即可驗證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴增系統(tǒng)的可信性;
7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。
如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個區(qū);
8.重復(fù)實驗,驗證結(jié)果,慎下結(jié)論。

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